重组鸡痘病毒rFPV-F-VP0实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用
目的：通过对real-time PCR反应条件的优化，建立重复性好，特异性、敏感性高的标准品和标准曲线。方法：将重组鸡逗病毒rFPV-F-VP0，分别接种CEF细胞传代20代次，提取1、5、 10、15、20代次重组鸡逗病毒的基因组，同时优化荧光定量PCR反应条件，根据病毒FHN和FVP0核酸序列，设计合成特异性引物，构建制备标准DNA模板。结果：各代次外源基因的拷贝数均不相同，对照FPV没有检测到外源基因拷贝数，检测引物TKsF/TKsR在各代次重组毒中没有检测到TK基因的表达，证明通过5-溴脱氧核糖尿苷(BrdU)加压筛选的鸡逗病毒构建正确。结论：为阐明重组鸡痘病毒的免疫机理和进一步的临床应用研究提供了理论基础。
重组鸡痘病毒 荧光定量PCR检测 基因表达 免疫机理
任静强 鲁会军 刘燕瑜 刘昊 岳云强 刘振江 金宁一
军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春 130122
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2011-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）