利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建天坛株痘苗病毒TK基因缺失痘苗病毒载体
研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP，构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK，利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP，与TTVV共转(感)染BHK细胞，通过同源重组获得重组病毒，并利用Brdu和荧光标记对其进行筛选。所获得重组病毒与表达Cre酶的重组表达质粒pVAX-Cre共转(感)染BHK细胞，敲除外源荧光标记基因(EGFP)，从而获得无外源筛选标记的天坛株痘苗病毒基因缺失载体，并通过PCR方法对所构建基因缺失载体鉴定。实验结果表明，利用Cre-loxp系统去除重组病毒中筛选基因具有潜在研究价值，为痘苗病毒载体的研究提供了一条解决问题的新途径。
天坛株痘苗病毒 双筛选标记 基因缺失 病毒载体
阚式绂 金宁一 李霄 王宇航 刘立明 王卓越 齐延新 王金辉 刘广臣
军事医学科学院全军基因工程重点实验室,吉林长春 130122
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2011-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）