单增李斯特氏菌MALDI-TOF-MS鉴定与分型研究
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-FOF—MS)技术是近几年发展起来的一种新型的软电离生物质谱，是直接气化并离子化非挥发性生物样品的质谱离子化方式。将被分析物的溶液和某种基质溶液混合，蒸发溶剂，使被分析物与基质成为晶体或半晶体，再用一定波长的脉冲式激光进行照射，基质吸收激光能量后，均匀地传递给待分析物，使待分析物瞬间气化并离子化。离子质量的不同导致其飞行速度不同而分离。MALDI-TOF—MS能完成细菌多种成分的分析，包括蛋白质、脂类、脂多糖和脂寡糖、DNA、多肽及其它能被离子化的分子。通过对细菌的特异性生物标志分子，即细菌含有的能给出唯一质合比的成分的检测可以实现对细菌属、种和株的水平的鉴定。本研究收集了37株单增李斯特氏菌分离株，样品来源包括冻鱿鱼、鸭翅、猪耳等十余类常见的动物源性食品，样品来源地区包括丹东、朝鲜、新西兰、挪威等十余个国家和地区。应用MALDI—TOF—MS采集图谱，获取独特的蛋白质指纹图谱，汇总成标准图谱，建立了单增李斯特氏菌鉴定数据库。采用9株单增李斯特氏菌标准菌株分别对建立的数据库进行验证，经数据库鉴定，9株标准菌株的匹配分数全部大于2.300，均报告为单增李斯特氏菌，表明鉴定结果的可信度很高。在数据库信息的基础上，对37株单增李斯特氏菌分离株进行了聚类分型。分型结果表明，在蛋白质水平，当差异水平为0.7—0.8之间时，MALDI—TOF—MS将37株菌分成4大型；当差异水平为0.5时，将37株菌分成7个型；在差异水平为0.3—0.4之间时，将37株菌分成9个型。从聚类分型的结果结合各菌株在收集时的基本信息，可以从亲缘关系远近的角度追溯致病菌的污染源问题。从而可以为单增李氏菌病的爆发和流行的预防和溯源提供技术支撑。
李斯特氏菌 病毒鉴定 分型研究 生物质谱 人畜共患病
王耀 曹际娟 赵昕 郑秋月 王刚 田卓 史媛媛
辽宁出入境检验检疫局，辽宁 大连 116001 庄河出入境检验检疫局，辽宁 庄河 121013 营口出入境检验检疫局，辽宁 营口 115000
国内会议
北京
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188-193
2011-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）