猪源TTV Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用

摘要：

　　根据TTV1和TTV2的非编码区（UTR）的保守序列分别设计并合成两套特异性引物和Taqman探针，建立了鉴别TTV1和TTV2的Taqman实时荧光定量PCR方法。通过常规PCR方法分别克隆TTV1和TTV2的非编码区（UTR）的保守序列并将其连入pMD-18T载体，制备阳性标准品，优化反应条件，以10倍系列稀释的标准品分别绘制标准曲线，TTV1标准曲线的相关系数为0.984，TTV2标准曲线的相关系数为0.994。检测结果显示，两种方法的灵敏度均可达10copies/μL，除猪源TTV外，对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪2型圆环病毒、猪流感病毒检测结果均为阴性。该方法重复性好，批内和批间变异系数均小于3％。检测采集自广西和内蒙古的44份病料，TTV1的阳性率为47.73%，TTV2阳性率为70.45%，TTV1和TTV2混合感染的阳性率为31.82%。猪源TTV检测方法的建立为该病毒的流行病学调查和定量提供了有效的手段。

关键词： 实时荧光定量PCR 猪源病毒 变异系数 混合感染 流行病学调查

作者: 侯军委 周艳君 王礞礞 李国新 于海 童光志

作者单位: 中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241

会议类型: 国内会议

会议名称: 上海市畜牧兽医学会2011年学术年会

会议地点: 上海

会议语种:中文

页码: 1-10

在线出版日期: 2011-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）