日本血吸虫Sj PRMT1基因的克隆、表达及表达产物的免疫保护效果分析
目的：克隆和表达日本血吸虫精氨酸甲基转移酶1（SjPRMT1）编码基因cDNA，分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况，评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。<br> 方法：从实验室构建的7 d 童虫消减cDNA 文库中，获得一个EST 序列，经序列测定和生物信息学分析命名为SjPRMT1，以Sj cDNA 为模板，获得其全长cDNA。荧光实时定量PCR分析该基因在童虫和成虫的表达情况。以pET28a(+）为载体构建重组表达质粒，Western blotting 检测重组蛋白的抗原性与免疫原性，利用重组抗原免疫小鼠评估其免疫保护效果。<br> 结果：获得了SjPRMT1 编码基因的全长cDNA，开放阅读框为660 bp，编码219个氨基酸。荧光实时定量PCR分析该基因在18 d 童虫高表达，13和23 d 次之。获得了SjPRMT1 重组蛋白，其具有良好的抗原性和免疫原性。在小鼠免疫试验中，与空白对照组比较，免疫组小鼠获得35.07％的减虫率和48.66%的肝脏减卵率。<br> 结论：获得了日本血吸虫童虫期高表达的SjPRMT1 基因的全长cDNA，成功构建了pET28a(+）-SjPRMT1 重组质粒，该重组抗原在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护效果。
日本血吸虫 精氨酸甲基转移酶1 免疫保护 基因克隆
韩宏晓 林矫矫 彭金彪 洪炀 王欣之 石耀军 傅志强 刘金明 程国锋 李祥瑞
中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241 南京农业大学动物医学院,南京 210095 中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241 南京农业大学动物医学院,南京 210095
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1-7
2011-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）