日本血吸虫胞蚴的体外培养和操作初探
目的:探究一种体外培养日本血吸虫胞蚴的新方法,并通过体外注射方法,感染阴性钉螺,培养阳性钉螺。<br> 方法:虫卵孵化的毛蚴与Spodoptera frugiperda卵巢细胞(sf9细胞)共培养,观察毛蚴的生长情况,并拍摄生长照片。使用显微注射针分别将3-5只母胞蚴注射到钉螺体内,观察钉螺逸蚴情况,逸出尾蚴人工感染昆明鼠检测尾蚴的活力,用组织化学染色法和PCR方法鉴定尾蚴的生物学特性。<br> 结果:拍摄毛蚴培养1小时、12小时、24小时及3天生长照片,毛蚴培养第12小时观察到纤毛板已脱落,培养2-3天虫体呈不断的伸缩运动,此后母胞蚴维持该状态并不转化成子胞蚴。三次实验的钉螺存活率分别为24.72%、28.23%和57.89%,活螺阳性率分别达4.55%、8.57%和14.29%。动物实验表明,人工培养的阳性钉螺释放的尾蚴具有感染性,且具有与日本血吸虫相同的生物学特性。<br> 结论:以sf9细胞作为滋养层细胞可以体外培养毛蚴,通过显微注射可以人工培养阳性钉螺。为日本血吸虫幼虫的体外操作提供一种新的方法。
日本血吸虫胞蚴 日本血吸虫尾蚴 卵巢细胞 钉螺 显微注射 体外培养 组织化学染色法
江艳 龚仁敏 杨艺 李小红 刘毅 朱传刚 陆珂 郑浩
中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241 安徽师范大学生命科学学院,芜湖 241000 安徽师范大学生命科学学院,芜湖 241000 中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241
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2011-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)