隐孢子虫P23基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
将隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genotype)P23基因亚克隆到pGEX-4T-1载体中,并用大肠杆菌BL21(DE3)为宿主菌诱导表达。以纯化的rP23为诊断抗原,建立隐孢子虫间接ELISA检测方法,观察其敏感性、特异性和重复性,并对临床血清样品进行检测。结果隐孢子虫鼠基因型P23基因在大肠杆菌中获得了高效表达。Western blot检测显示rP23能被隐孢子虫感染兔血清识别。以纯化rP23为诊断抗原,成功地建立了检测兔隐孢子虫病的间接ELISA技术。对23份临床血清检测结果显示,该方法检出率高于Sheather”s蔗糖漂浮法、nested PCR法。本研究结果为研制兔隐孢子虫病诊断试剂盒打下了基础。
隐孢子虫 原核表达 间接ELISA检测 试剂盒
张国恩 米荣升 苏庆美 黄燕 周鹏 胡义彬 秦培兰 呼高伟 陈兆国
中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心,上海 200241
国内会议
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1-10
2011-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)