青藏高原一年生野大麦(Hordeum spontaneumC.Koch)4个类钙调神经磷酸酶B亚基(calcineurin B-like protein)基因的克隆
鉴于目前世界范围内环境的恶化对作物抗逆育种提出了更高的要求，本研究拟从青藏高原野生大麦同源克隆类钙调磷酸酶B蛋白家族基因，把这些基因转入到模式植物拟南芥和水稻中，研究这些基因的功能。根据拟南芥、水稻、高粱、栽培大麦、小麦等植物的CBL基因家族的基因序列设计兼并引物，从而获得4个CBL基因的部分cDNA序列；然后通过环化单链介导的cDNA快速末端克隆技术(circular first-strand cDNA-mediatedRACE(cRACE))获得基因HsCBL2、HsCBL3和HsCBL6的cDNA；根据HsCBL8基因片段与栽培大麦EST序列高度相似的特点，我们获得了该基因的DNA编码区的全长，该基因编码区内含有7个内含子和8个外显子；最后通过反向PCR(Inverse PCR)和巢式PCR(Nest PCR)技术相结合的方法获得这些基因的上游调控区（启动子区）。与栽培大麦的EST和cDNA比较来看，HsCBL2的序列与栽培大麦的cDNA完全相同，HsCBL6只有一个氨基酸的差异(S to G at 29 sites),HsCBL3和HsCBL8都出现了较多的变异。这些说明，栽培大麦在人工驯化过程中某些基因的功能发生了变化。我们已经把这些基因及其可能的启动子区导入到水稻和拟南芥中，以期通过研究这些基因在这两种模式植物的功能，为作物的抗逆遗传工程育种提供可能的野生等位基因资源。
抗逆育种 野大麦 类钙调神经磷酸酶B亚基
郭万里 涂士伟 吴丽丽 姜宇晓 张国平 蒋立希
浙江省杭州市凯旋路268 号,浙江大学作物科学研究所
国内会议
沈阳
中文
50
2010-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）