柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的克隆表达与免疫保护性试验
目的：对柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)杨凌株RB1-a基因进行克隆与表达，检测表达产物的免疫保护性，为鸡球虫的基因工程疫苗的研制奠定基础。<br> 方法：以纯化的E.tenella杨凌株孢子化卵囊的总RNA为模板，用RT-PCR方法扩增出其RB1-a基因，测序后进行序列分析。然后将RB1-a基因N端不含信号肽序列克隆到表达载体pET-32a(+)中，构建pET-32a-RB1-a重组质粒，并在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达出重组蛋白，将重组蛋白纯化后免疫雏鸡，对其免疫效果进行评价。<br> 结果：E.tenella RB1-a基因的开放阅读框(ORF)包含618个碱基，编码205个氨基酸，与报道的E.acervulina PAPa46株ORF序列相似性为99.84％，两者推导的氨基酸序列相同。SDS-PAGE分析表明，重组质粒表达产物为42 ku的融合蛋白。各种抗球虫指标的测定结果显示，RB1-a免疫组和RB1-a+佐剂免疫组的相对增重率分别为64.2％和69.4％，卵囊减少率达到37.22％和30.56％，ACI分别为146.2和1.50.4。<br> 结论：RB1-a基因具有很强的保守性，种间差异不大；重组蛋白具有部分免疫保护效果，该研究为鸡球虫基因工程疫苗的研制奠定了基础。
柔嫩艾美耳球虫杨凌株 RB1-a基因 克隆表达 免疫保护 序列分析
彭维刚 于三科 黄妮 胡冰 林青 宋军科
西北农林科技大学动物医学院,陕西 杨凌 712100
国内会议
中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会
武汉
中文
19-26
2011-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）