利用SELEX技术筛选获得结核患者血清IgG抗体适体
目的：利用SELEX技术筛选获得结核患者血清IgG抗体的特异性适体。<br> 方法：体外合成长度为78个核苷酸的随机ssDNA文库，利用SELEX技术筛选，以结核患者血清中的IgG抗体为靶标进行筛选；筛选得到的饱和ssDNA适体文库，经克隆测序获得单个适体，生物素-亲和素显色系统检测适体与靶标的亲和性，DNAMAN软件分析适体的二级构象，血清学检测进行适体特异性的鉴定。<br> 结果：纯化获得的IgG抗体浓度为1.3mg/mL。SELEX筛选10轮后，随机挑选13个适体进行亲和性检测和二级结构分析。结果显示，亲和性吸光度值大于1.0的适体有5个。二级构象分析揭示，适体与靶分子的结合基础为口袋颈环鼓包结构和分枝的连接角度。对亲和性吸光度值大于1.0的5个适体，经29份临床标本检测进行特异性的进一步验证显示，其中有4个适体对结核病组与健康对照组的检测结果具有显著差异。<br> 结论：初步筛选获得结核患者血清IgG抗体的适体，并有较高的特异性。
结核病 IgG抗体 SELEX技术 特异性适体 显色系统
秦莲花 柏文娟 胡忠义 刘忠华 杨华
同济大学附属上海市肺科医院/上海市结核病(肺)重点实验室 上海 200433
国内会议
桂林
中文
282-284
2011-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）