RORγt对急性哮喘小鼠脾源性CD4+T细胞亚群Th17细胞的影响
目的:探讨急性哮喘小鼠脾源性CD4十T细胞中RORγ t表达的变化以及RORγ t对急性哮喘小鼠脾源性CD4+ T细胞亚群Th17细胞分化和致炎机能的影响。方法:首先研磨小鼠脾脏制成单细胞悬液后裂解红细胞,再予免疫磁珠分离小鼠脾源性CD4十T细胞,悬于加有胎牛血清的RPMI 1640培养液,加入ConA和PMA刺激培养24小时后行real-time PCR,Westernblotting测定小鼠脾源性CD4+T细胞亚群Th17细胞中RoRγ t的表达,流式细胞仪测定Th17细胞阳性率,ELISA法检测脾源性CD4+T细胞培养上清中IL-17的浓度,并分析急性哮喘组小鼠RORYt的表达与Th17细胞阳性率及IL-17浓度的相关性。结果:(1)急性哮喘组小鼠脾源性CD4+T细胞RORγ t的mRNA及蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.01)。 (2)急性哮喘组小鼠脾源性CD4+T细胞中Th17细胞阳性率明显高于正常对照组(P<0. 01) 。(3)急性哮喘组小鼠脾源性CD4+T细胞培养上清中IL-17的浓度明显高于正常对照组(P<0. O1)。(4)急性哮喘组小鼠脾源性CD4+T细胞中RORγ t的mRNA表达与Th17细胞阳性率、IL-17的浓度均呈正相关(r=0.854 0.872; P均<0. 01)。(5)急性哮喘组小鼠脾源性CD4+T细胞中RORγ t的蛋白表达与Th17细胞阳性率、IL-17的浓度均呈正相关(r=0.902, 0.891; P均<0.01)。结论:(1)急性哮喘小鼠脾源性CD4+T细胞中RORγ t的表达显著增高。(2)急性哮喘小鼠脾源性Th17细胞的分化和致炎机能显著增高。(3)急性哮喘小鼠脾源性CD4+T细胞中RORγ t的表达与Thl7细胞的分化和致炎机能呈正相关。
急性哮喘 Th17细胞 致炎机能 RORγt蛋白 动物模型
刘绍坤 向旭东 杨沫毅 王谷宜 刘毅 陈平
中南大学湘雅二医院呼吸科 410011
国内会议
2011中华医学会呼吸病学年会暨第十二次全国呼吸病学学术会议
广州
中文
545-546
2011-09-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)