新型Src激酶抑制剂BRP800对人肺腺癌细胞株H1299生长抑制作用及其机制研究
目的：研究新型Src激酶抑制剂BRP800对人肺腺癌细胞株H1299细胞增殖和凋亡影响，并初步探讨其可能的分子机制。方法：(1)将BRP800作用于人肺腺癌细胞细胞H1299，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测吸光度值，计算对照组和各实验组细胞的生长抑制率。(2)倒置显微镜观察BRP800作用后的H1299细胞形态学变化。(3)流式细胞仪(FcM)检测BRP800作用于人肺腺癌H1299 24h后细胞周期的变化，以及凋亡作用，计算细胞凋亡率；(4)Western Blot法检测Src激酶及其信号通路上蛋白以及与细胞周期、凋亡相关的蛋白因子的表达。结果：(1) MTT法显示BRP800能有效抑制H1299细胞的生长，呈时间和剂量依赖性，BRP800和Dasatinib各浓度组与IOnM组之间差异均有统计学意义(P<0. 05 )。(2) Western Blot分析：①细胞周期蛋白<Cyclins)： CyclinA, B1, D1, D3, E；②周期蛋白依赖激酶(CDKs)： CDK4, 6, 9；③CDKs抑制剂(CK工s) P21, 27；④磷酸化的视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)和p53。结论：(1)通过MTT法发现BRP800对人肺腺癌H1299细胞具有生长抑制作用，并呈时间、剂量依赖性；(2)倒置显微镜下观察显示BRP800可使人肺腺癌H1299细胞固缩，视野内细胞密度稀疏，细胞与细胞间粘附下降，细胞活性降低，生长缓慢。(3)细胞流式检测显示BRP800使人肺腺癌细胞株H1299细胞阻滞于细胞周期Go/G1，期，但BRP800未能诱导人腺肺癌细胞株H1299凋亡。(4)Western Blot检测细胞周期相关蛋白表达进一步证实了BRP800作用于细胞周期Go/G，期。(5)BRP800具有抑制Src激酶活性，其对人肺腺癌H1299的生长抑制的分子机制可能通过阻断Src/PI3K /AKT激酶级联信号转导通路发挥作用。
Src激酶抑制剂 肺腺癌细胞株 生长抑制 细胞活性
陈刚 凌春华
苏州大学附属第一医院呼吸科 215006
国内会议
2011中华医学会呼吸病学年会暨第十二次全国呼吸病学学术会议
广州
中文
716-717
2011-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）