我国HIV-1CRF01_AE和CRF07_BC亚型流行株全长基因组克隆的构建
目的:构建HIV-1 CRF01_AE和CRF07_BC亚型流行毒株的全长基因组克隆。方法:HIV的基因组较长,需用MLU1酶将其分为两个半分子(2.9kb和6.9kb)进行扩增,然后利用低拷贝质粒pLG338为载体构建HIV-1YA001毒株(CRF01_AE亚型)和YA004毒株(CRF07_BC亚型)的全长基因组克隆,将克隆所得全长基因组进行测序并进行序列分析。结果:得到CRF01_AE和CRF07_BC亚型毒株的全长基因组克隆各4株,并通过测序得到模板毒株YA001和YA004的全部序列信息及其系统进化分析和重组分析结果,但TCID50和p24抗原测定结果显示,实验所得的全长基因组克隆还不具备感染性。结论:得到在我国广泛流行的HIV-1 CRF01_AE和CRF07_BC亚型毒株的全长基因组克隆,鉴定了毒株的基因组序列和重组特征,但尚未获得由全长基因组克隆包装出来的感染性病毒,可能由于基因突变导致了感染性缺失,下一步将纠正序列可能存在的突变,并改进转染方法,以获得这两株病毒的感染性克隆。
人类免疫缺陷病毒 亚型流行株 全长基因组克隆 序列分析
韩婧婉 王铮 李敬云
军事医学科学院微生物流行病研究所 北京 100071
国内会议
银川
中文
118-124
2011-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)