肠道病毒71抗原ELISA定量检测方法构建及其应用
目的：建立肠道病毒71型(EV71)抗原的定量ELISA检测方法。可用于EV71疫苗研发及生产过程中的病毒抗原含量检测、EV71的TCID50试验及病毒免疫原性与免疫保护性的关系分析。方法：EV71或其重组抗原免疫小鼠制备的高亲和力抗EV71的中和单抗用作包被抗体和HRP标记抗体，构建定量检测EV71抗原的双抗体夹心ELISA方法，该方法经方法验证。以EV71国家抗原标准品为定量依据检测样品中的EV71抗原量，比较本法与显微观察法检测的EV71‘TCID50。对EV71抗原的特异比活与免疫血清中和抗体水平进行相关性分析。结果： 本方法检测抗原的线性范围为0.125-4.0U／ml、R2=0.9911、灵敏度达到0.125 U/ml，试剂特异性、准确性、精密度和稳定性良好。本法与显微观察法检测的EV71TCID50的相关性高，r=0.990。21株EV71病毒抗原的特异比活与免疫血清中和抗体间存在强相关性。结论：构建了性能良好的EV71抗原的ELISA定量检测方法，取代显微观察法准确、客观和特异的分析EV71的TCID50，本方法用于检测EV71抗原的特异比活，有望取代动物效力实验评价疫苗的免疫保护性。
肠道病毒71 抗原性 ELISA定量检测 免疫保护性
韩金乐 贾继宗 李川 杨亮 何德磊 李娟 叶祥忠 李益民
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2011-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）