流感病毒H1N1在MDCK细胞的培养及纯化条件的优化
目的：优化流感病毒H1N1在MDCK细胞上的培养条件，高效扩增流感病毒。方法：对MDCK细胞培养流感病毒时添加的TPCK-Trypsin的浓度和培养基的种类进行了筛选；比较了不同细胞代次的MDCK对流感病毒的易感性；按MOI值0.001、0.01、0.1于MDCK细胞上接种H1N1，CPE>75％收获病毒上清，并按MOI值0.001接种H1N1后连续培养5天，分别于1、2、3、4、5天收获病毒上清，HA试验检测上清滴度，上清浓缩纯化后行TCID50检测，分别选取最佳的接种MOI值和收毒时间；最后对浓缩纯化病毒的红细胞吸附方法进行检验。结果：通过对比，TPCK-Trypsin的最佳作用浓度是0.25μg／ml，MEM为培养病毒的最佳培养介质；代次低的MDCK对流感病毒的易感性明显强于代次高的MDCK细胞；于MDCK细胞按MOI值0.001接种H1N1，且第3天收获的上清病毒滴度最高；红细胞吸附法能高效浓缩纯化流感病毒。结论：优化了在MDCK细胞上培养及纯化流感病毒的方法。
流感病毒 MDCK细胞 感染复数 红细胞凝集 半数组织感染量
冯婷 涂文伟 黄娟 李晋蓉 殷仲伟 范营营 李虹
四川大学华西第二医院港大联合研究中心 四川大学华西第二医院港大联合研究中心 香港大学李嘉诚医学院儿科及青少年医学系
国内会议
银川
中文
261-265
2011-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）