重组人胱抑素C的纯化工艺研究
目的：研究重组人胱抑素C蛋白(Cystatin C)的纯化工艺。方法：含重组质粒pET-32a-Cystatin C的E-coli BL21(DE3)基因工程菌，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达Cystatin C融合蛋白。重组的融合Cystatin C蛋白经金属鳌合亲和层析纯化后，用重组肠激酶(enterokinase)酶切，经Q Sepharose FF柱与金属鳌合亲和柱分离纯化，得到高纯度的Cystatin C蛋白。结果：经层析纯化得到目的蛋白，SDS—PAGE鉴定，其相对分子质量为13.4kD，且蛋白纯度达95％以上。结论：建立了重组人胱抑素C蛋白的纯化工艺，获得高纯度的Cystatin C蛋白，为制备单克隆抗体和多抗以及研制快速测定人血清中Cystatin C含量的检测试剂奠定了基础。
人胱抑素C蛋白 纯化工艺 酶切技术 检测试剂
冯杰 韩友斌
上海科华生物工程股份有限公司,上海 200233
国内会议
银川
中文
614-616
2011-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）