大口黑鲈溃疡综合症病毒TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

　　根据大口黑鲈溃疡综合症病毒(Largemouth bass ulcerative synclrome virus，LUBSV)的甲基转移酶(MTase)基因核苷酸序列设计引物及TaqMan-MGB探针，优化荧光定量PCR反应条件和反应体系，建立了LBUSV的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法。用含有MTase基因的质粒pDNA-MT系列稀释作为标准品模板，在荧光定量PCR仪上进行PCR反应，绘制出曲线，斜率为-3.24，R2=0.999，呈现很好的线性关系，扩增效率1.04，灵敏度检测结果表明，PCR反应24个循环时可以检测到得质粒最小浓度是102拷贝数/uL。选用107、106、105、104拷贝数/uL4个浓度梯度质粒做模板，变异系数在1.1～3.4%范围内，说明该方法具有良好的重复性和稳定性。利用该方法可以准确地检测出感染LBUSV的病鱼，特异性强。

关键词： 大口黑鲈 溃疡综合症病毒 TaqMan-MGB探针 荧光定量PCR反应

作者: 马冬梅 白俊杰 邓国成 李胜杰 张莉莉

作者单位: 中国水产科学研究院 珠江水产研究所 热带亚热带鱼类选育与养殖重点开发实验室 广州 510380

会议类型: 国内会议

会议名称: 南方十六省(市、区)水产学会渔业学术论坛暨第二十七次学术交流大会

会议地点: 昆明

会议语种:中文

页码: 57

在线出版日期: 2011-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）