Rv2653c在大肠杆菌中的克隆与表达研究
目的:从H37Rv标准株克隆出结核菌Rv2653c基因并进行表达与初步分析。方法:根据H37Rv基因组序列合成引物,以PCR方法钓取Rv2653c基因,克隆到pGEM-T上,挑取阳性克隆进行测序,将正确编码基因克隆到pET24b载体上,在BL21大肠杆菌菌株中以IPTG诱导表达重组蛋白。以金属螯合层析初步分离纯化重组蛋白,采用western blot方法对重组抗原进行抗原性初步分析。结果:首先获得了重组的Rv2653c编码的蛋白,表达产率不低于20%,初步纯化纯度约90%,以人血清进行的westernblot分析发现,Rv2653c重组蛋白有较好的抗原性。结论:获得了Rv2653c重组蛋白为进一步寻探讨其功能及应用价值奠定基础。
结核分枝杆菌 大肠杆菌 基因克隆 Rv2653c基因 蛋白表达 结核病
李邦印 孙卫国 程小星 孙昌文 熊志红 王仲元 王金河 苏锐
解放军第309医院结核病研究室 北京 100091
国内会议
上海
中文
43-47
2010-10-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)