表达短Lef-1 dsRNA的转基因家蚕抑制BmNPV增殖研究
为了探讨RNAi 抑制家蚕核型多角体病毒(BmNPV)增殖的效果，用带有lef-1 dsRNA表达盒的转基因 载体pigA3-LEF-Neo转染家蚕BmN培养细胞,通过G418（750-800μg/mL）筛选，获得了稳定转化细胞系。 病毒感染试验显示，稳定转化细胞的病毒感染率比正常细胞低53％，转化细胞形成的多角体数量大 约为普通细胞中的2/3，细胞培养上清中的游离病毒减少了90％，表明病毒在转化细胞中的增殖受到明显抑 制；半定量RT-PCR 结果显示，转化细胞中病毒lef-1 的转录水平仅为正常细胞的2/5-3/5，表明转化细胞 表达的lef-1 dsRNA 抑制了病毒lef-1基因的表达同时将pigA3-LEF-Neo载体导入蚕卵，通过G418 和绿色荧光的双重筛选，并经分子生物学鉴定获得了转基因家蚕。G6代的转基因系统抗性鉴定结果显示， 除G6-B1外，转基因家蚕对BmNPV的半数致死浓度也提高了大约2-4倍，感染死亡率下降了5％-30％。
RNAi 家蚕核型多角体病毒(BmNPV) 转基因 细胞 转座子
叶秋霞 鲁银松 薛仁宇 曹广力 贡成良
苏州大学基础医学与生物科学学院,苏州,215123
国内会议
杭州
中文
47-56
1900-01-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）