会议专题

BmCPV多角体蛋白对异源蛋白的包埋

为了探索家蚕质型多角体在体内对蛋白的包埋特性,对从从患病家蚕中肠纯化的BmCPV 蛋白进行液相色谱- 串联质谱分析,共鉴定了28种蛋白质,其中5种蛋白质BmCPV编码,23种蛋白质来自宿主家蚕,显示宿主蛋白可 以被包埋进BmCPV的多角体中。结构分析显示,被包埋的宿主蛋白的结构与多角体蛋白的结构或病毒结构蛋白VP3 的N末端结构有相似之处;将多角体蛋白基因克隆pIZT/V5-his,转染BmN细胞后通过抗生素Zeocin筛选获得稳定 表达多角体蛋白的细胞株。荧光显微镜观察发现,转化细胞有轻度的病理变化,细胞质中有多角体蛋白结晶;纯化 的多角体经串联质谱分析,发现有2种蛋白来自培养细胞, 异源蛋白的结构发现,其三维结构均与BmCPV多角体 蛋白的左手结构很相似;对以修饰型线性家蚕杆状病毒BmPAK6感染稳定转化细胞,96 h后纯化多角体,回复感染 结果显示,质型多角体蛋白能包埋BmPAK6;纯化的多角体及多角体裂解液能使X-gal显色,表明BmPAK6表达β 半乳糖苷酶能被质型多角体包埋。因此,可以认为BmCPV 多角体蛋白可以包埋宿主细胞蛋白、也可包埋异源病毒 粒子。

家蚕质型多角体病毒 多角体 蛋白 包埋 串联质谱

张轶岭 孟祥坤 潘中华 郑小坚 曹广力 薛仁宇 贡成良

苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州 215123

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中国蚕学会商品性小蚕饲养规程和蚕病防控学术研讨会

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1900-01-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)