芸香苷诱导的家蚕基因BmGSTd1基因转录水平
实时荧光定量PCR ( real-time quantitative PCR, qPCR )因灵敏度高,定量准确等特点, 已广泛应用于基因表达分析。利用合适的参照基因对qPCR 数据进行校正处理是确保该方 法分析准确性的关键。为了选出适用于家蚕诱导实验中q-PCR 检测分析的合适参照基因, 首先检测家蚕谷胱甘肽-S-转移酶基因d1( BmGSTd1)在正常饲养及添食芸香苷后在中肠和脂 肪体中的转录水平,分别用三种内参基因( Actin3 , GAPDH , 28S rRNA)和加入外源参照基因 ( IFP2)对检测结果进行标准化,结果发现内源和外源基因标准化的结果差异很大;通过测 定三种内参基因的诱导转录水平,结果表明三者在两种组织中的诱导转录水平均有较大变 化。以上结果表明,内源基因在诱导后的表达并不恒定,而外源基因则不受实验条件的影响, 能保证定量结果的准确性。选择加入外源参照基因对qPCR 数据进行归一化处理,是家蚕 诱导实验中检测基因表达的合适方法。
实时荧光定量PCR 家蚕 参照基因 芸香苷 诱导
卫正国 张婷 高瑞娜 王瑞娴 赵国栋 李兵 沈卫德
苏州大学基础医学与生命科学学院 现代丝绸国家工程实验室 苏州大学基础医学与生命科学学院 现代丝绸国家工程实验室 苏州大学蚕桑研究所,中国江苏苏州 215123
国内会议
昆明
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1900-01-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)