Renin Receptor在大肠杆菌中的表达、复性并同时纯化
目的:重组的肾素受体(RnR)在E coli中表达易形成难溶于水的包涵体,必须进行蛋白复性才能获得有生物活性的目标蛋白。 方法:通过对诱导时间的考察,优化了RnR在摇瓶中的发酵培养条件,并采用疏水型色谱饼对RnR进行复性并同时纯化。 结果:在优化条件下,RnR在E coli中的表达量可达34.8%。将RnR包涵体分别用8.0 mol/L脲和7.0 mol/L盐酸胍(GuaHCl)提取,用疏水型色谱饼对其进行复性并同时纯化,结果表明前者可得到两个目标蛋白色谱峰,质量回收率分别为30.2%和62.4%,而后者仅得到一个目标蛋白峰,质量回收率为36.3%。 结论:采用疏水色谱饼解决了由于RnR疏水强易形成聚集沉淀的难题,可在30min内对RnR完成分离纯化的同时进行复性,建立了重组RnR复性并同时纯化新工艺。
重组肾素受体 疏水色谱 色谱饼 蛋白复性 生物活性 分离纯化
郭金金 白泉 姚婷 龚为民
西北大学 现代分离科学研究所/合成与天然功能分子化学教育部重点实验室,陕西 西安 710069 中国科学院 生物物理研究所,北京 100101
国内会议
西安
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V2.239-240
2010-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)