离子交换色谱对重组人肿瘤坏死因子-α的复性并同时纯化
目的:采用弱阴离子交换色谱(WAX)对E coli表达重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)进行了复性并同时纯化。 方法:分别考察了流动相pH值、流动相中脲浓度、GSH/GSSG比例等因素对rhTNF-α复性的影响。 结果:上述因素对rhTNF-α复性效率和质量回收率均有较大的影响。GSSG/GSH可有效提高rhTNF-α二硫键的正确对接和复性效率，而低浓度的脲则可有效抑制蛋白沉淀，可大大提高质量回收率。 结论:采用离子交换色谱法建立了小rhTNF-α复性并纯化新工艺。在最优化条件下，可在30 min中内对rhTNF-α进行复性并同时纯化。经一步色谱分离纯化，其纯度可达95.2％，质量回收率可达77％，比活达到2.18×108IU/mg。
肿瘤坏死因子-α 表达重组 蛋白复性 分离纯化 离子交换色谱
李国庆 任文轩 王骊丽 白泉
西北大学 现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室/合成与天然功能分子化学教育部重点实验室,陕西 西安 710069
国内会议
西安
中文
V2.251-252
2010-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）