强阳离子交换色谱复性靶向性rhTum-5-NGR研究
目的:提高靶向性rhTum-5-NGR的复性效率。 方法:采用阳离子交换色谱复性rhTum-5-NGR,考察了上样量、梯度长度、流动相pH、GSH/GSSG比例等色谱条件。 结果:流速0.5 mL/min,梯度洗脱40 min,流动相A液和B液分别为pH6.0和8.0的缓冲溶液,并添加一定量的GSH/GSSG。在此条件下,复性回收率为95%左右,经透析、冷冻干燥后,蛋白可溶于20 mmol/L PBS溶液中,浓度为100 μg/mL,对内皮细胞增殖抑制率可达68%。 结论:该方法可有效解决融合蛋白的溶解性问题,为富含二硫键的多肽/蛋白的产业化生产奠定基础。
rhTum-5-NGR 强阳离子交换色谱 包涵体复性 靶向性 融合蛋白 多肽
刘萍 王艳 杨赛娜 李聪 申烨华
西北大学 化学与材料学院,陕西 西安 710069
国内会议
西安
中文
V2.260-261
2010-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)