结缔组织生长因子特异性小分子干扰RNA的筛选及其在抗肝纤维化中的作用
目的：设计和合成针对抗肝纤维化关键基因结缔组织生长因子(connectivetissue growth factot,C17GF)的特异性小干扰RNA(siRNA),并筛选高效的CTGFsiRNA抗肝纤维化序列,探讨其通过尾静脉注射是否具有抗大鼠肝纤维化作用。<br> 方法：1.设计3段R3qA干扰候选序列,分别转染正常干细胞株(L-02),筛选高效的CTGF siRNA序列。2.分别对肝纤维化模型大鼠进行干预。雄性SD大鼠30只,随机分成5组,分别为模型组腹腔注射40％CCl4(3ml/kg)及尾静脉注射生理盐水,1次/3d,连续8周；预防组腹腔注射40％CCl4及尾静脉注射CTGF siRNA(0.1mg/kg),1次/3d,连续8周； 2W(week)治疗组腹腔注射40％CCl42周,后给予CTGF siRNA及CCl46周； 4W治疗组腹腔注射40％CCh4周,后给予CTGF siRNA及Ccl44周； 空白对照组尾静脉注射生理盐水8周。于最后一次CCl4注射3天后取血及组织标本,检测肝纤维化指标,应用Real-Time PCR及western印迹法检测CTGFmRNA及蛋白质在大鼠肝组织表达,应用Masson染色检测肝组织纤维化。<br> 结果：与模型组(0.544±0.019)相比预防组(0.105±0.003)及2w治疗组(0.190±0.006)大鼠肝组织CTGFmRNA及蛋白质表达显著下调(p<0.05),肝组织炎症、坏死及纤维化明显减轻,肝纤维化指标显著降低(p<O.05)。4W治疗组与模型组相比各指标降低,与预防组及2W治疗组相比各指标相对升高(p<0.05)。<br> 结论：成功筛选出高效的cTGFsiRNA,且经尾静脉注射CTGF siRNA能显著抑制大鼠体内肝脏CTGF基因表达并能有效防治大鼠肝纤维化,且对于病程较长的肝纤维化也有一定的治疗作用,提示CTGF siRNA在抗肝纤维化治疗中有重要作用,将成为抗肝纤维化治疗的新靶点。
结缔组织生长因子 小分子干扰RNA 抗肝纤维化 基因筛选
毛小荣 岳伟 袁宏 陈红 薛苗
兰州大学第一医院传染科 730000
国内会议
兰州
中文
331-332
2011-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）