鸡IL-1β和IL-2及IL-6基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
为了建立荧光定量PCR检测鸡IL—1β,IL-2及IL-6基因的方法,根据GenBank上IL-1β,IL-2,IL-6的基因序列,在保守区设计并合成各自特异引物,选择β—actin和GAPDH为内参,采用SYBRGreen 1染料法,以常规PCR产物为标准品,建立标准曲线,并进行熔解曲线分析。结果表明,各基因标准曲线Ct值检测范围在12—33左右,有良好的线性关系,r2均大于0.990。熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰。本实验建立的鸡IL—1β,IL-2及IL-6基因实时荧光定量RT—PCR方法灵敏度高、特异性强、检测周期短,为从mRNA水平对鸡IL进行定量分析奠定了基础。
IL-1β IL-2 IL-6 实时荧光定量PCR 鸡
刘丽达 倪学勤 曾东 魏豪 李洁萍
四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心 四川,雅安 625014 四川省疾病控制中心 四川,成都 610000 四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心 四川,雅安 625014动物疫病与人类健康四川省重点实验室 四川,雅安 625014 四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心 四川,雅安 625014
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290-294
2010-12-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)