重组奶牛NPY成熟肽基因在毕赤酵母中的高效表达

摘要：

为了获得可用于临床前研究的具有生物学活性的重组奶牛NPY成熟肽．试验从牛的下丘脑组织中提取总RNA，利用RT-PCR技术兜隆出NPY成熟肽基因．并在其N-末端加上24bp的FLAG标签，将该片段以正确的阅读框插入载体pPICZαA构建表达质粒pPICZαA-FLAG-NPY，表达质粒经线性化电转于毕赤酵母GS115，Zeocin抗生素筛选高拷贝重组子，重组子GS115／pPICZαA-FLAG-NPY经甲醇诱导,Tricine-SDS-PAGE检测表达上清，结果在约4.5kDa的位置有一条明显的蛋白带，与预期分子量相符，Westernblotting鉴定，结果与抗FLAG的M2抗体发生特异性免疫反应．结果表明，重组奶牛NPY成熟肽基因在毕赤酵母GS115中成功表达．

关键词： 奶牛 NPY 毕赤酵母表达系统 成熟肽基因

作者: 吴殿君 白鸽 王振全 许远靖 王冲 刘国文 周昌芳

作者单位: 吉林大学畜牧兽医学院，吉林 长春 130062

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会小动物医学分会第六次学术研讨会暨中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十八次学术研讨会

会议地点: 乌鲁木齐

会议语种:中文

页码: 333-337

在线出版日期: 2011-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）