大肠杆菌色氨酸操纵子基因的克隆与表达
目的：提高色氨酸操纵子中所有酶的高效表达和酶活性的提高,方法：利用PCR的方法从大肠杆菌31884基因组中直接克隆出色氨酸操纵子,并将其连接到原核表达载体pet22b(+)中,得到重组质粒pet22b(+)-trp operon,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE分析并用比色法测定其活性。结果：凝胶电泳可见PCR扩增产物大小约为7kb,SDS-PAGE鉴定目的蛋白分别得到了高效表达,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性分别比对照提高了2．7倍和3．2倍。结论：成功构建了重组质粒pet22b(+)-trp operon,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的表达量和表达活性在大肠杆菌中得到了提高,为高产色氨酸基因工程茵的构建奠定基础。
Trp Operon 色氨酸 合成
林维平 孙同毅
山东潍坊医学院基础医学部,潍坊,261042
国内会议
天津
中文
158-160
2008-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）