4.1R基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞系的建立及应用
目的：建立4.1R基因缺失的小鼠胚胎成纤维细胞系，为研究细胞骨架蛋白4.1对细胞迁移的调控提供实验模型。 方法：从C57BL/6J-4.1R-/--和C57BL/6J-4.1R+/+小鼠胚胎中分离培养胚胎成纤维细胞，SV40大T 抗原转化法筛选出可以在体外连续传代的细胞系；Western Blot 鉴定4.1 蛋白家族、粘着斑形成相关蛋白Paxillin和β Ⅰ 整合素(β1 integrin)的表达，共聚焦显微镜观察比较 C57BL/6J-4.1R+/+与C57BL/6J-4.1R/-小鼠胚胎成纤维细胞的肌动蛋白张力纤维和粘着斑形成。自动聚 焦视频显微镜进行活细胞运动能力比较；流式细胞术检测细胞表面β1 integrin的活化。 结果：从C57BL/6J-4.1R-/-小鼠中分离出的胚胎成纤维细胞可以在体外连续传代，与C57BL/6J-4.1R+/+小鼠胚胎 成纤维细胞相比135kDa、80kDa4.1R 分子表达缺失，而4.1 蛋白家族的其他成员4.1B、4.1N、4.1G 及 Paxillin 表达正常，β1 integrin 表达上调，细胞运动能力和伤痕愈合能力明显增强，细胞表面活化的β1 integrin 明显降低。 结论：成功建立4.1R基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞系，4.1R通过β1 integrin 活化调控MEF运动，为研究4.1R对细胞运动调控的机制提供了基因工程细胞模型。
4.1R 细胞骨架蛋白 基因敲除 胚胎成纤维细胞 细胞迁移
康巧珍 时晓芳 郭欢 闫红霞 高艳锋 祁元明 安秀丽
郑州大学生物工程系 郑州 450052
国内会议
南宁
中文
926-934
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）