shRNA干扰沉默胰岛素受体底物-1对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化过程中ERK及NF-κB信号通路的影响
目的:观察胰岛素受体底物-1表达受阻对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化过程中ERK和核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:用Western blot检测空白对照组和转染IRs-1 shRNA质粒的删组3T3-L1前脂肪细胞分化过程中各时间点ERK、磷酸化ERK(P—ERK)、NF—κ Bp65、磷酸化NF-κBp65(P—NF—κ Bp65)和IKB—α的表达差异。结果:小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,ERK在0天即表达很高,一直持续到第6天,第8天开始有所降低,从第8天到第12天,逐渐降低;P—ERK的表达逐渐降低;NF—κ Bp65在0天即有表达,第4天表达增加,从第4天到第12天,表达逐渐增高:P—NF—κ Bp65在整个分化过程中未检测到;IKB—α的表达基本与NF—κ Bp65的表达相反:IRλ—1基因沉默后,小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,ERK和p—ERK的表达从0天到12天均无变化;NF—κ Bp65的表达在第2天和第4天降低,第6天以后又恢复到与0天相当的水平;P—NF—κ Bp65在整个分化过程中未检测到;IK8-α的表达基本与NF—κ Bp65的表达相反。结论:IRS—1通过负性调节ERK和正性调节NF—κ B信号途径促进3T3-L1前脂肪细胞的分化成熟:IRS—1可能是脂肪细胞发育中ERK和NF—κ B信号转导通路中的重要上游分子。
NF-κB信号通路 胰岛素受体底物-1 细胞分化
唐玲丽 周后德
中南大学湘雅二医院检验科 410011
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68-72
2010-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）