小鼠肝炎病毒N蛋白基因在杆状病毒中的表达

摘要：

目的：利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小鼠肝炎病毒N基因。 方法：根据GenBank发表的小鼠肝炎病毒A59株N基因序列(AY700211),设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增出N基因的ORF,将目的片段克隆入pFastBacHTa中,构建重组转移载体pFastBHa-N。将重组质粒转化DH10Bac感受态细菌,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组穿梭载体Bacmid-N。通过脂质体将其转染昆虫细胞sf9。 结果：获得了重组杆状病毒rBN,并通过Westem blot和IFA分析表明证实N蛋白在昆虫细胞中获得正确表达,且表达产物具有抗原性。 结论：本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了小鼠肝炎病毒N蛋白,为进一步进行建立诊断学方法的研究奠定了基础。

关键词： 小鼠肝炎病毒 N基因 杆状病毒表达

作者: 周洁 宋宇 姜浩 胡建华 高诚

作者单位: 上海实验动物研究中心,上海 201203 上海市实验动物质量监督检验站,上海 201203 东华大学化学化工与生物工程学院,上海 200032 苏州大学医学部,苏州 215123

会议类型: 国内会议

会议名称: 华东地区第十一届实验动物科学学术交流会暨实验动物规范化、标准化研讨会

会议地点: 烟台

会议语种:中文

页码: 8-14

在线出版日期: 2010-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）