猪a干扰素的原核表达及活性测定

摘要：

为了研究高效广谱的基因工程抗病毒制剂，设计含双酶切位点的引物自猪肝脏总DNA扩增、克隆猪a干扰素(PoIFN-a)成熟肽基因，将成熟肽基因亚克隆入原核表达载体pQE30并进行IPTG诱导表达，对表达的融合重组蛋白(rPoIFN-a)进行尿素变性、复性液复性、PBS溶液透析等方法进行纯化，采用细胞病变抑制法测定fPoIFNa的抗滤泡性口炎病毒(VSV)活性并确定rPoIFN-a的抗病毒活性单位。结果：成功克隆了PoIFN-a成熟肽基因，全长501bp，无内含子，编码166个氨基酸;表达的rPOIFN-a蛋白分子量大小约为20.5 kD左右;经纯化后蛋白纯度存95％以上;纯化rPoIFNa蛋白在PK-15细胞上抗VSV病毒活性效价约为1.0×104U/mL。本研究成功表达了具有生物学活性的PoIFNa蛋白。

关键词： 猪a干扰素 基因克隆 原核表达 纯化 活性测定

作者: 闫若潜 赵雪丽 盛敏 赵明军 刘光辉 吴志明

作者单位: 河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州 450008

会议类型: 国内会议

会议名称: 河南省畜牧兽医学会第七届暨2008年学术研讨会理事会第二次会议

会议地点: 郑州

会议语种:中文

页码: 108-111

在线出版日期: 2008-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）