鸡传染性支气管炎HN99株M基因在杆状病毒中的表达

摘要：

鸡传染性支气管炎病毒HN99株膜蛋白(M)基因的阳性重组质粒pMD18-T-M经BamH Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切，克隆入杆状病毒真核表达载体pFastBacHTa-MBP。将所构建的重组表达质粒pFastBacHTa-MBP-M转化到ACBacmid-egfp菌中，采用脂质体转染法用重组的ACBacmid-egfp-MBP-M转染Sf9细胞，经两代盲传后，在倒置显微镜下可见转染Sf9细胞核膨大，细胞折光性增加，细胞增大最后破碎，与正常Sf9细胞差别明显;在荧光显微镜下可以看到细胞浆内有绿色的荧光，用出现病变的Sf9细胞提取DNA，分别用M13引物、特异性引物进行PCR鉴定，成功地从病变细胞中扩增出特异性序列，表明已经产生重组病毒。表达产物的SDS-PAGE和Western Blot分析表明，重组病毒蛋白条带大小约为68Ku，与预期的结果一致。

关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 M基因 真核表达 杆状病毒

作者: 贺秀媛

作者单位: 河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州 450002

会议类型: 国内会议

会议名称: 河南省畜牧兽医学会第七届暨2008年学术研讨会理事会第二次会议

会议地点: 郑州

会议语种:中文

页码: 146-153

在线出版日期: 2008-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）