西藏小型猪瘦素受体基因胞外区部分片段的克隆及原核表达
根据猪瘦素受体基因胞外域序列(GenBank号：AF167719.1)设计并合成三对分别覆盖编码区55-1020位、1052-1851位、1686-2351位核苷酸的引物，以西藏小型猪肝脏总RNA为模板，经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得了特异性片段。再以该三个特异性片段为模板，另外设计三对套式引物扩增瘦素受体基因胞外域编码区304—951位、1054-1623位、1687-2346位cDNA片段，将该三片段克隆人pMD18-T载体并转化感受态细菌E.coliDH5α测序并永久保存。此三片段经酶切后克隆到表达载体PRSETA的BamHⅠ和HindⅢ两酶切位点之间，构建重组质粒pR-OBR-p、pR-OBR-m、pR—OBR-a。以上三个质粒在转化感受态细菌E.coliBL21(DE3)后，在IPTG诱导下促使重组菌pR-OBR-a表达了相对分子质量27655左右的重组融合蛋白。说明重组质粒pR-OBR-a在大肠杆菌BL21(DE3)中可表达两藏小型猪瘦素受体片段蛋白。
猪瘦素受体基因 胞外域序列 原核表达
吴丽红 范沛 唐华 袁进 刘闻 李海滨 顾为望 施振旦
南方医科大学实验动物中心暨比较医学研究所,广州 510515 华南农业大学动物科学学院,广州 510642
国内会议
乌鲁木齐
中文
196-201
2010-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）