vMIP-Ⅱ在毕赤酵母中的表达及其体外活性的研究
目的：通过基因重组构建重组质粒pPICZaA-vMIP—Ⅱ.将重组质粒转化到酵母当中，筛选获得稳定表达目的蛋白的工程菌。方法：通过基因克隆，酶切，连接，最终得到重组质粒pPICZaA—vMIP—Ⅱ，通过电击转化，PCR筛选鉴定得到工程菌，甲醇诱导表达后先后采用Ni亲和层析柱和分子筛层析柱进行纯化，Western—Blot对所得蛋白进行鉴定，并用趋化抑制实验进行生物活性检测.结果：在小量诱导表达水平上，目的蛋白的表达量在10mg/L左右;趋化抑制实验中，vMIP—Ⅱ在0.5ng／ml～500ng／ml浓度间对PBMC的抑制率达40％～80％，EC50的有效浓度为2.44ng／ml.结论：通过本课题的研究，建立起一种新的利用真核表达系统获得病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ的途径，其表达纯化过程效率得到了很大提高，并且表达纯化的蛋白具有生物活性.
病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ 毕赤酵母 生物活性 基因克隆
贾忠伟 王峰 莫雪梅 孙晗笑
暨南大学基因组药物研究所,广州 510632
国内会议
黄山
中文
252-256
2006-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）