人神经生长因子在哺乳细胞CHO内的表达及鉴定
通过构建人神经生长因子的几种不同真核表达载体,并增加一些转录及翻译调控元件、更换信号肽序列,比较人神经生长因子的表达水平,从中选择适合高表达人NGF的真核载体。将构建的三种重组质粒pMD902-β-NGF,pcDNA3.1-β-NGF和pcDNA3.1-His-β-NGF质粒转染CHO细胞,ELISA检测NGF的表达。pMD902-β-NGF、pcDNA3.1-β-NGF、pcDNA3.1-His-β-NGF均表达NGF,pcDNA3.1-His-β-NGF的表达水平最高。鸡胚背根神经节检测法检测表达NGF蛋白的生物学活性,均能刺激鸡胚背根神经节周围长出放射状的神经纤维,表明表达的人神经生长因子有较好的生物学活性。
人神经生长因子 基因克隆 真核表达 生物活性
李越希 戚菁 李素芹 李琳 潘明洁
南京军区军事医学研究所医药生物技术研究所,江苏省医药生物技术重点实验室 南京 210002
国内会议
绵阳
中文
223-226
2010-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)