mPEG-PCL-g-PEI聚合物的合成及其siRNA递送性能
目的：合成siRNA递送载体mPEG-PCL-g-PEI，进行体外siRNA递送研究。方法：通过开环聚合反应制备二嵌段共聚物mPEG-PCL-OH，将mPEG-PCL-OH的羟基末端依次活化为羧基和琥珀酰亚胺端基形成mPEG-PCL-NHS活化物，然后将mPEG-PCL-NHS枝接到聚乙烯亚胺(PEI)的伯胺基上，得到PEI的接枝产物mPEG-PCL-g-PEI。应用FTIR，1H-NMR、GPC等对合成聚合物进行结构表征。采用合成聚合物材料通过复凝聚法制备载siRNA纳米粒。测定纳米粒的粒径和Zeta电位；通过体外转染实验，考察了不同N/P比的mPEG-PCL-g-PEI/siRNA纳米粒对萤火虫荧光素酶基因表达的抑制效率；比较mPEG-PCL-g-PEI聚合物和PEI两者递送siRNA的效果以及两种载体的细胞毒性。结果：成功合成聚合物(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k。 (mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k/siRNA纳米粒的粒径为50-200nm，纳米粒表面荷有正电荷（< 20 mV）。粒径随着N/P比的增加而减小，Zeta电位随着N/P比的增加而升高；基因表达抑制效果在N/P=125时较好，与阳性对照组比较无显著差异（P＞0.01）；(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k递送siRNA的能力强于PEI10K，两者具有显著性差异（P﹤0.01）。MTT结果显示，(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k 产生的细胞毒性远远低于PEI10K。结论：聚合物mPEG-PCL-g-PEI合成工艺切实可行，制备简便，能够递送siRNA进入细胞来抑制报告基因表达，且细胞毒性较低，能够成为一种新型的siRNA递送载体。
siRNA递送 非病毒载体 聚乙烯亚胺 体外转染 合成工艺
黄伟 吕明 金明姬 杨长青 高钟镐
中国医学科学院北京协和医学院药物研究所,北京 100050 延边大学药学院,吉林 延吉 133000
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2010-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）