生长因子基因活化基质材料在促进自体韧带移植愈合中的体内外应用研究
血小板衍化生长因子基因活化材料的制备及生物活性检测目的：构建含有人血小板衍化生长因子-B(hPDGF-B)基因片段的真核表达质粒，并利用兔成纤维细胞做生物活性检测。方法：应用基因重组技术和限制性内切酶双酶切构建并鉴定EGFP-N1-hPDGF-B真核表达载体，体外培养兔成纤维细胞，传代培养后用阳离子脂质体(LipofectAMINE)：EGFP-N1—hPDGF-B为3μL：1μg的比例转染，G3418筛选获得稳定转染的细胞。通过RT-PCR和荧光法检测PDGF-B表达水平; 利用四甲基偶氮唑法检测PDGF-B的生物学活性绘制成纤维细胞生长曲线。结果：成功构建含EGFP-N1-PDGF-B基因的真核表达载体，经RT-PCR检测了PDGF-B在转录水平mRNA的表达情况，荧光法检测目标基因成功转染至靶细胞，转染后的成纤维细胞呈强阳性表达，并持续4周以上。结论：重组真核表达载体构建正确，并能在成纤维细胞中表达PDGF-B mRNA，PDGF-B基因转染可使成纤维细胞有效而稳定的表达活性PDGF-B而产生生物效应。对成纤维细胞有明显的促进生长作用。
血小板衍化生长因子-B 真核质粒 基因转染 成纤维细胞
陈岗
上海长征医院骨科 上海 200003
国内会议
上海
中文
619-620
2010-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）