会议专题

紫花苜蓿LEA第3组基因(MsLEA3-1)的克隆与分析

利用从紫花苜蓿盐胁迫cDNA文库中筛选到的一个与大豆基因pGmPM10(accession No.AAA91965.1)同源的EST序列,进行3’-RACE和5’-RACE,获得一个cDNA全长序列为1728bp的基因,命名为MsLEA3-1,并将序列递交至genebank,登录号为EU665182。MsLEA3-1最大开放阅读框编码一个含有436个氨基酸的蛋白,等电点为5.18,分子量为47.0 KD。对MsLEA3—1蛋白氨基酸序列进行同源比对分析表明,与大豆LEA蛋白pGmPM10同源性最高,E值为1e-108。蛋白质氨基酸序列分析表明:氨基酸组成及含量与其他LEA蛋白非常接近,小分子量氨基酸和亲水性氨基酸含量非常高,致使蛋白质高度亲水;氨基酸序列中存在31个11-mer重复序列,其一致序列为TKDYAGDAAEK,表明MsLE3—1为第3组LEA蛋白;N端有明显的信号肽特征,C端有一内质网滞留信号类似序列,推测这一LEA蛋白可能在内置网内行驶功能;二级结构预测显示,MsLEA3-1蛋白的二级结构主要由α-螺旋组成,11-mer重复能形成兼性α-螺旋,推测其结构在细胞脱水状态下LEA蛋白发挥作用具有重要意义。通过半定量RT-PCR验证了MsLEA3-1基因受盐胁迫诱导表达量增加。

紫花苜蓿 盐胁迫 基因克隆 RT-PCR

金后聪 杨青川 孙彦 康俊梅 晁跃辉 金洪 龙瑞才 李燕

内蒙古农业大学农学院 内蒙古 呼和浩特 010018 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 北京 100193 中国农业大学草地研究所 北京 100193 重庆大学生物工程学院 重庆 400030 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 北京 100193 内蒙古农业大学农学院 内蒙古 呼和浩特 010018

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2010-05-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)