H1、H3亚型猪流感病毒核酸疫苗构建及鉴定
构建双亚型(H1/H3)流感病毒血凝素真核表达质粒,并采用HeLa细胞进行表达。通过PCR分别改造已获得的H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段,在融合片段间引入(G4S)3柔性linker和口蹄疫2A蛋白linker。采用DNAstar结合生物信息学软件InsightⅡ分析后对其空间构象进行模拟和评价。将融合表达H1HA1和H3HA的基因片段克隆至真核表达载体pVAX1 CMV启动子下游。通过脂质体法转染HeLa细胞,进行RT-PCR与间接免疫荧光检测。结果表明,成功构建了表达双亚型(H1/H3)流感病毒血凝素真核表达载体pVAX1-H3HA-H1HA1,RT-RCR表明重组质粒在转染HeLa细胞后出现了目的基因的转录,IFA证实目的基因在HeLa细胞上可有效表达,该研究为抗H3、H1亚型流感病毒双价核酸疫苗的研究奠定了基础。
流感 真核表达 HeLa细胞 血凝素
谭磊 张丹 鲁会军 田明尧 田宇飞 金扩世 金宁一
军事医学科学院军事兽医研究所 长春 130062 吉林大学畜牧兽医学院 长春 130062 军事医学科学院军事兽医研究所 长春 130062
国内会议
郑州
中文
420-424
2010-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)