TGEV和PEDV多重RT-PCR检测方法的建立及其细胞分离培养研究
根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的ORF2(s基因)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)CV777株的ORF6(N基因)核酸序列,经DNA sis 2.0比较分析,分别筛选出TGEVS基因和PEDVN基因相对保守区,利用PrimerPremier=5.0软件设计两对引物。多重RT-PCR得到与预期大小相一致的约858bp和511bp的产物,特异性试验表明,多重RT-PCR不与猪伪狂犬病毒(PRV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪瘟病毒和猪轮状病毒反应,特异性良好;敏感性试验表明多重RT-PCR能检测10 TVID50/mL疫苗毒。将猪传染性胃肠炎、轮状病毒二联活疫苗和疑似腹泻猪粪便分别在ST细胞和Vero-E6细胞上进行增殖,经RT-PCR和金标试纸条检测,分别盲传5代、10后成功分离出TGEV和PEDV病毒。
TGEV PEDV 多重RT-PCR
李霞 张春红 赵亚华 张建峰
广东省农业科学院兽医研究所 广东省兽医公共卫生公共实验室 广东广州 510640 华南农业大学生命科学学院,广东广州 510642 广东省农业科学院兽医研究所 广东省兽医公共卫生公共实验室 广东广州 510640 华南农业大学生命科学学院,广东广州 510642
国内会议
郑州
中文
429-432
2010-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)