会议专题

利用SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒S基因方法的建立

为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因SyBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据Genbank收录的TGEV-Miller毒株S蛋白基因序列,设计合成一对引物,用RT-PCR方法从疫苗株中扩增TGEV S基因,将纯化后的PCR产物与pGEM-T Easy载体连接并转化宿主细胞DH5α,得到阳性重组质粒pGEM-TS。以重组质粒为标准模板,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR标准曲线,并进行灵敏度和特异性试验。结果显示建立的猪传染性胃肠炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法具有灵敏度高、检测快速、定量准确、特异性和重复性好等优点,可用于临床猪传染性胃肠炎病毒感染检测。

猪传染性胃肠炎病毒 荧光定量RT-PCR S基因 SYBR Green Ⅰ

张云 罗线连 王瑞宁 郭东辉 胡慧

河南农业大学 牧医工程学院,郑州 河南 450002

国内会议

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

郑州

中文

473-478

2010-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)