会议专题

抗猪隐孢子虫单克隆抗体的制备及鉴定

目的: 筛选特异性强、亲和力高的抗猪隐孢子虫(Cryptosporidumsuis)单克隆抗体(McAb),并探讨其生物学活性。方法:将纯化的猪隐孢子虫卵囊冻融和超声波处理后免疫BALB/c小鼠,取阳性免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合;经间接ELISA法筛选,有限稀释法进行克隆;用间接ELISA叠加试验.间接免疫荧光试验鉴定McAbs的免疫反应活性。结果:获得3株能稳定分泌抗猪隐孢子虫McAbs的杂交瘤细胞林,命名为1E1C5、1E11A5,287A1,分别属于IgM、IgG3和IgG2a类;其细胞培养上清效价分别为1:3200、1:1600和1:3200,小鼠腹水效价分别为1:1.6×105、1:1.6×105和1:0.8×105;ELISA叠加试验表明3株单抗可识别两个不同抗原位点,lElC5有较高的亲和力;免疫荧光试验结果显示3株单抗均能与猪隐孢子虫卵囊壁反应,但与艾美耳球虫、人隐孢子虫(C.hominis)有微弱的交叉反应。结论:获得了3株可识别猪隐孢子虫卵囊壁的McAbs,为进一步开展猪隐孢子虫快速诊断研究奠定了基础。

猪隐孢子虫 单克隆抗体 免疫荧光

安春霞 闫若潜 吴志明 黄磊 王强 刘光辉 张盼盼 张龙现 宁长申

河南省动物疫病预防控制中心 郑州河南 450008 河南农业大学牧医工程学院 郑州河南 450002 河南省动物疫病预防控制中心 郑州河南 450008 河南农业大学牧医工程学院 郑州河南 450002

国内会议

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

郑州

中文

604-609

2010-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)