猪白细胞介素-6的原核表达及其生物学活性研究
本研究采用RT-PCR方法自细菌脂多糖(LPS)刺激的猪脾脏细胞总RNA中扩增克隆出了猪白介素-6(porcine inteleukin-6,PolL-6)成熟肽基因,并亚克隆入pQE30载体进行原核表达,对表达的融合重组猪白介素-6(rPoIL-6)蛋白通过尿素变性、低浓度复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,采用rPoIL-6 ELISA试验方法检测rPoIL-6蛋白与抗PoIL-6单抗发生特异性免疫反应的活性。采用MTS法检测rPoIL-6蛋白的促猪脾脏细胞的增殖活性。结果表明:成功克隆了rPoIL-6成熟肽基因,基因全长555bp;表达的rPoIL-6蛋白分子量大小约为20Ku;经纯化后的蛋白质纯度在95%以上;rPoIL-6蛋白能和抗PoIL-6单抗发生特异性反应,MTS法检测表明,rPoIL-6蛋白具有促进猪脾脏细胞的增殖活性。
猪白介素-6 基因克隆 原核表达
马文涛 闫若潜 吴志明 刘光辉 盛敏 谢彩华
河南农业大学 牧医工程学院 河南郑州 450002 河南省动物疫病预防控制中心 河南郑州 450008
国内会议
郑州
中文
625-628
2010-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)