利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建基因缺失天坛株痘苗病毒载体

摘要：

研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP，构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK，利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP，与TTVV共转(感)染BHK细胞，通过同源重组获得重组病毒，并利用Brdu和荧光标记对其进行筛选。 所获得重组病毒与表达Cre酶的重组表达质粒pvAX-Cre共转(感)染BHK细胞，敲除外源荧光标记基因(EGFP)，从而获得无外源筛选标记的天坛株痘苗病毒基因缺失载体，并通过PCR方法对所构建基因缺失载体鉴定。实验结果表明，利用Cre-loxp系统去除重组病毒中筛选基因具有潜在研究价值，为痘苗病毒载体的研究提供了一条解决问题的新途径。

关键词： Cre-loxp系统 双筛选标记 天坛株痘苗病毒 TK基因

作者: 阚式绂 李霄 王宇航 王卓越 齐延新 贾鹏 杜寿文 金宁一

作者单位: 军事医学科学院 全军基因工程重点实验室 长春 130062 吉林大学 长春 130062 军事医学科学院 全军基因工程重点实验室 长春 130062 深圳出入境检验检疫动植物检验检疫技术中心 广东深圳 518001

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

会议地点: 郑州

会议语种:中文

页码: 663-669

在线出版日期: 2010-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）