猪白细胞介素-2基因的克隆及其重组禽痘病毒载体的构建
目的: 为研究猪IL-2生物学功能及其应用前景。方法: 本实验采用RT-PCR技术自豫南黑猪脾淋巴细胞中扩增猪IL-2基因(pIL-2)基因，RT-PCR产物进行T-A克隆、测序，获得了猪IL-2基因序列。将BamH I酶切的猪IL-2基因非定向克隆到BamH I酶切并去磷酸化的pSY538载体上，通过PCR、酶切和测序鉴定，筛选正向插入的重组质粒pSY538/pIL-2。Not I酶切pSY538/pIL-2后，得到含有双启动子LP2和EP2的猪IL-2基因片段，将其亚克隆到含有LacZ基因的pSY681载体上，筛选正向插入的重组禽痘病毒转移质粒pSY681/pIL-2。结果: 测序结果表明，克隆的豫南黑猪IL-2基因为482bp，包含1个完整读码框(465bp)，与GenBank中其它5条猪IL-2基因核苷酸同源性为99.9％。重组质粒pSY681/pIL-2经酶切、测序鉴定，证实含有目的片段，且连接、构建正确。结论:本研究成功构建了重组禽痘病毒转移质粒pSY681/pIL-2，为猪IL-2生物学功能的进一步研究和开发奠定基础。
猪白细胞介素-2 基因克隆 重组禽痘病毒
王淑娟 崔保安 陈红英 刘金朋 王亚丹 朱前磊 王子馨
河南农业大学 牧医工程学院，河南 郑州 450002
国内会议
郑州
中文
744-750
2010-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）