重组猪IgGIIB类Fc受体剪接异构体胞外区及结构域的原核表达与抗体制备
根据GenBank中猪IgGIIB类Fc受体剪切异构体基因序列(FJ608551)，利用Primer 5.0软件设计合成3对特异性引物，从质粒pTG19-T-swFcγRIIb1中用PCR方法扩增编码胞外区、EC1及EC2蛋白分子基因片段，PCR产物经Kpn I+EcoR I双酶切后将其插入到原核表达载体pET-32a中，构建了三种猪Fcγ RIIB剪接异构体原核表达载体pET-EY、pET-AY、pET-BY，转化大肠杆菌BL21，在IPTG诱导下成功表达了分子量约为36kD、29kD、27kD融合蛋白表达，纯化后的融合蛋白分别免疫小鼠制备鼠源血清。ELISA结果显示抗体效价为1∶5120，1∶5120，1∶10240。免疫印迹结果显示制备的多克隆抗体可以与融合蛋白特异性结合。
猪 FcγRIIB 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
刘肖萍 刘玉松 夏平安 赵琳 范旭 徐红运 张凤华 张志远 崔保安
河南农业大学牧医工程学院，郑州，450002
国内会议
郑州
中文
756-761
2010-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）