猪圆环病毒2型ORF2基因的克隆及其真核表达载体的构建与真核表达
为了给猪圆环病毒2型的诊断和基因工程疫苗的研究奠定基础,试验根据GertBank中猪圆环病毒2型的核酸序列设计了1对引物,采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪病料组织中扩增出了ORF2基因,将其克隆到pMD18-T载体上,筛选获得了重组质粒pT—ORF2,结果表明:以重组质粒pT-ORF2为模板设计出1对引物,扩增出含ORF2主要抗原位点的区段566bp,经Bam H Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切。将回收的ORF2基因转移入真核表达载体pcDNA3.0,构建了重组表达质粒pcDNA3.0-ORF2,然后将重组质粒真核表达载体转染到BHK-21细胞中并成功的进行了真核表达。
猪圆环病毒2型 ORF2 克隆 真核表达
赵军 杨霞 陈圆圆 王新卫 常洪涛 刘红英 姚慧霞 王川庆
河南农业大学牧医工程学院 郑州 450002
国内会议
郑州
中文
231-235
2010-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)