猪圆环病毒2型ORF2基因的表达及活性研究
根据PCV2的已知序列设计一对引物，PCR扩增其去核定位信号(NLS)的Cap基因(ORF2)。通过SphⅠ/HindⅢ双酶切位点将其克隆到表达载体pQE30中，转化大肠杆菌JM109。经IPTG诱导表达、经SDS-PAGE、Westem Blot鉴定，表明Cap蛋白在宿主菌JM109中可以大量表达，然后收集菌体、通过裂解、收集包涵体、尿素变性、复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行Cap蛋白纯化。结果表明，成功克隆了NLS—ORF2基因并表达了Cap蛋白，融合蛋白大小24.1 kD左右，与预期大小相一致，经纯化后的蛋白纯度在95％以上;Western Blot鉴定结果表明Cap蛋白可以和抗PCV2单抗反应，具有很好的抗原性;为以后PCV2诊断方法的建立和疫苗的研究及开发奠定了基础。
PCV2 基因克隆 基因表达
谢彩华 闫若潜 陈涛 吴志明 张志凌 张健
河南省动物疫病预防控制中心 河南郑州 450008
国内会议
郑州
中文
235-238
2010-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）