猪瘟病毒RT-LAMP快速检测方法的建立和应用

为了研究检测猪瘟病毒(CSFV)的快速诊断方法,本试验采用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),分别设计了六条针对CSFV 5’端保守基因特异引物,经条件优化后,建立猪瘟病毒RT-LAMP快速检测方法。结果表明,在63℃恒温条件下45分钟,就能很好的扩增出CSFV目的片段:RT-LAMP产物经XHhoI酶酶切确定产物即为目的片段:将CSFV和其它六株与CSFV同属的病毒进行RT-LAMP扩增,结果只有CSFV得到阳性结果,其它均为阴性,验证了该方法的特异性;敏感性试验表明,RT-LAMP对CSFV的最低检测量为1×101个基因拷贝,是常规RT-PCR敏感度的100倍;用CSFV RT-LAMP法和RT-PCR检测方法分别对27份临床样本进行检测,结果证明CSFV RT-LAMP与RT-PCR方法检测结果的符合率为92.6%.
猪瘟 快速诊断 反转录环介导等温扩增技术
曲光刚 杨慧 唐娜 王金良 付石军 谢金文 岳福杰 沈志强
山东省滨州畜牧兽医研究院预防兽医学与动物生物技术重点实验室 山东滨州 256600 山东绿都生物科技有限公司 山东滨州 256600 荣成出入境检验检疫局 山东荣成 264300 山东省滨州畜牧兽医研究院预防兽医学与动物生物技术重点实验室 山东滨州 256600 山东绿都生物科技有限公司 山东滨州 256600
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郑州
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283-288
2010-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)